拉曼光譜共聚焦顯微鏡將三種核心技術(shù)——拉曼光譜分析、光學(xué)顯微成像與共聚焦技術(shù)——巧妙地結(jié)合在一起,使我們不僅能“看”到樣品的微小形貌,更能“讀”出它的分子信息,堪稱一款強(qiáng)大的“化學(xué)物質(zhì)分析儀” 。
那么,它究竟是如何工作的?簡單來說,拉曼光譜是一種基于光與物質(zhì)相互作用的非彈性散射效應(yīng)而產(chǎn)生的光譜。當(dāng)激光照射樣品時,極少數(shù)光子的能量會發(fā)生變化,這種變化反映了樣品分子的振動和轉(zhuǎn)動能級信息,如同人類的指紋一樣具有特殊性,因此可以用來精確識別物質(zhì)的化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu) 。而共聚焦顯微技術(shù)的關(guān)鍵,則在于在光路中巧妙地設(shè)置了一個針孔(pinhole)。這個針孔像一個空間濾波器,能夠阻擋來自樣品焦平面之外的雜散光,只讓聚焦點的信號通過 。這一設(shè)計賦予了儀器強(qiáng)大的三維層析能力,使它能夠?qū)悠愤M(jìn)行“光學(xué)切片”,獲取不同深度的信息。
拉曼光譜共聚焦顯微鏡能夠?qū)崿F(xiàn)微米級甚至亞微米級的高空間分辨率分析。對于只有原子層厚度的新型二維材料,如石墨烯,普通拉曼光譜儀由于激光光斑過大,信號極易被基底干擾所掩蓋。而共聚焦顯微拉曼系統(tǒng)能將激光光斑聚焦到1微米左右,精準(zhǔn)地激發(fā)出石墨烯的特征信號,從而判斷其層數(shù)和質(zhì)量 。在高分子聚合物研究中,它可以用來分析薄膜表面的微小瑕疵,或者無損地檢測多層復(fù)合薄膜中每一層的化學(xué)結(jié)構(gòu)和厚度,整個過程無需破壞樣品 。
其次,它具備強(qiáng)大的三維成像能力。通過逐點掃描和逐層聚焦,該技術(shù)可以重建樣品在三維空間中的化學(xué)成分分布圖 。
總的而言,拉曼光譜共聚焦顯微鏡并非僅僅是一臺顯微鏡或一個光譜儀,它是一個高度集成的分析平臺。憑借其高分辨率、無損、免標(biāo)記和三維成像的獨特優(yōu)勢,它已經(jīng)成為從新材料研發(fā)到疾病診斷等眾多領(lǐng)域不可少的研究工具。